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深圳市瑞沃德生命科技有限公司
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針對脂肪組織,如何有效提高病理冰凍切片質量?

發布:深圳市瑞沃德生命科技有限公司
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“沃”的專家團


這是一檔來自瑞沃德解決方案專家團隊的分享欄目,瑞沃德解決方案專家團隊人員規模超50,其成員均為知名高校生物醫學相關專業的碩博研究生,可為客戶提供垂直細分領域的實驗方案、解決日常產品應用難點,全力幫助客戶取得成功。


脂肪組織冷凍切片,是臨床和科研上避不開的一類常見組織切片。
臨床上周邊帶脂肪比較多的組織主要有淋巴結、乳腺癌小腫塊等;科研上主要是一些皮膚組織像腹部皮膚,頸部皮膚等。接下來就跟大家交流一下脂肪組織切片的相關細節和注意事項。


組織前處理


臨床上沒有太多的時間處理帶脂肪多的組織,簡單的操作就是取材完,把組織放置于吸水紙上,輕輕按壓,盡量擠出脂滴后,再用包埋劑包埋,然后放置在冷凍切片機箱體里冷凍??蒲猩弦驗闀r間比較充裕,可以有更多時間剔除掉周邊脂肪組織,提高切片質量。


速 凍


1.樣本托提前預冷
在我們自己和客戶的實際切片操作中發現,放置于室溫包埋好的組織再放到速凍臺上制冷,因為托本身前后溫差大,就會產生水汽,造成結霜結晶,影響切片質量,所以第 一步就是樣本托提前放置在箱體預冷,當然是要干燥的樣本托。


2.取材

取材盡量不要太厚,厚度在2-3mm為宜,因為厚度太小可能取材難度較大,取材不完整,厚度太大冷凍慢,當然能滿足需求的前提下,取得薄效果更好,大小在1-2cm為宜。


3.包埋
樣本托尺寸可以選擇大一些的,方便組織攤開,提高冷凍效率。包埋劑不宜過多,一是包埋劑過多,凍得比較慢,另外包埋劑預冷容易卷曲,給后期展片加大了難度。

必要時為了加快冷凍,可以使用冷錘輕壓在組織表面輔助冷凍(注意輕壓時機,不宜過早,容易粘?。?。


切 片


在切片之前,要調節好冷凍切片機切片溫度,根據經驗和反饋,雙制冷機器(同時擁有箱體制冷和樣本頭制冷)的切片效果要比單制冷機器(只有箱體制冷)好。


因為帶脂肪組織切片溫度需求較低,甚至低于單制冷機器箱體能設置的最 低溫度的下限,所以這時候就需要其他的制冷方式來輔助??梢杂靡旱评?,但成本較高;也可以采用雙制冷機器,一般樣本頭溫度可設置范圍為-10℃~-50℃。保證脂肪組織切片效率。


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固 定


我們經常在鏡下看到片子的著色不深或者細胞退變等現象,主要原因就是固定不及時,這個跟個人習慣有比較大的關系,為了初步判定切片的效果,習慣性的貼好片后會等下看一下片子情況,就是這極短的時間導致組織在干燥的空氣中出現細胞退變,尤其是高溫環境,影響更深,這就要求我們及時切片,及時把片子放入固定液中固定。


但這也對技術人員和冷凍切片機提出了更高的要求,那就人員要求更加專業,機器要求制冷和溫控性能要更好。


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經驗復盤


怎樣做好脂肪組織切片,所涉及的因素很多,有主觀的,有客觀的,我們站在前人的肩膀上,所做的就是要提升,要優化,所以經驗復盤很重要。永遠都是只有更好,沒有最 好,切片也是一樣,行業標準在提高,技術人員也要時刻提升自己。


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2023-10-26
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