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VITEK? 2 COMPACT鑒定 | 生物指示劑嗜熱脂肪地芽孢桿菌

發布:梅里埃診斷產品(上海)有限公司
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導語


我們收到關于在驗收生物指示劑時,Geobacillus stearothermophilus(嗜熱脂肪地芽孢桿菌)有時會被錯誤地鑒定為Geobacillus toebii (堆肥土桿菌 )或Geobacillus thermoleovorans (嗜油土桿菌 )等問題。為什么會出現這樣的結果?怎樣做可以一步到位,獲得好的鑒定結果?

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1、定義

按照滅菌方式方法以及不同的滅菌部位及介質,目前市面上有很多種形式的生物指示劑,按照《中國藥典》可分為三類:


載體型生物指示劑

芽孢懸液型生物指示劑

自含式生物指示劑


為了保證滅菌效果,法規要求使用商用生物指示劑時,需要制定驗收標準,一般包括微生物純度和形態的鑒定及測定微生物數量,當然也有很大一部分用戶會對其微生物進行鑒定,確認指示劑中的菌株是否為目標菌株,比如嗜熱脂肪地芽孢桿菌。


眾所周知,生物指示劑載體上或者液體中的芽孢為休眠狀態的孢子,所以按照藥典方法進行總芽孢計數的過程中需要進行熱激活處理,即將生物指示劑經過一系列的前處理過程后得到的芽孢懸液置于滅菌試管中在95-100℃下熱激活15min(嗜熱脂肪地芽孢桿菌),之后立刻轉移到0-4℃的冰水浴中冷卻至室溫,得到激活后的芽孢懸液,再進行后續的計數操作。熱激冷激的步驟主要目的是為了使休眠狀的孢子復蘇萌發,并將存活的繁殖體殺滅。所以后續計數得到的數量就是生物指示劑中原始休眠狀芽孢的數量,進而來評估生物指示劑是否符合標準。


2、原理

對于VITEK? 2 COMPACT來說,設備在研發的過程中用到的是菌的營養體,因為當菌體處于芽孢體的狀態下無法很好的表達生化特性。當我們回溯異常鑒定結果所用到的新鮮單菌落的時候,發現單菌落均來自于芽孢計數的培養基上,也就是計數用的菌懸液均經過了熱激冷激的步驟,雖然該菌在培養基中萌發了一代,但是該菌的生理生化代謝仍然不是處于最 佳的狀態,無法與營養體相提并論。進而得到了錯誤的鑒定結果。


3、方案

針對生物指示劑的微生物鑒定(嗜熱脂肪地芽孢桿菌),我們給到的建議是:

1. 將生物指示劑置于TSB培養基中,在55-60℃,培養18-24小時,得到生物指示劑的增菌液。

2. 將增菌液分離到TSA平板,55-60℃培養18-24小時。

3. 挑取單個菌落,按芽孢制備方法,制備均一菌懸液,濁度為1.8-2.2McF,使用BCL卡上機鑒定。

4. 獲得準確鑒定結果。

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2023-10-27
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